实时荧光定量PCR仪的十大品牌是哪些？

柏恒科技呀，其他的不清楚。我们实验室用的就是柏恒科技的Q3200，具有独特的双槽设计，A、B槽可运行不同的实验程序。可以在网上学习下，支持触摸屏控，作简单。同时兼容电脑端软件分析，适合较为复杂的数据处理。

实时荧光定量pcr仪 实时荧光定量pcr仪用途

实时荧光定量pcr仪 实时荧光定量pcr仪用途

且具有较快的升降温速率，尤其是Q3200F单次实验可节约数十分钟。

实时荧光定量PCR可以用来测定DNA浓度吗

实时荧光定量PCR可以用来测定DNA浓度吗 实时荧光定量PCR不是用来测浓度的，可以用来做基因的拷贝数。但是如果你的产物单一，有相应的标准品，也是可以测浓度的，浓度的准确性和你的标准曲线相关。

实时荧光定量PCR：

实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Bios 公司推出的一种新定量试验技术，它是通过荧光染料或荧游标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时线上反应过程，结合相应的软体可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。

检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。

测定DNA浓度的方法：

DNA纯度和浓度的检测:分光光度(紫外吸收)法

1.预热紫外分光光度计10-20分钟。

2.取所需的比色杯（4ml），其中一只装入3 mlH2O溶液，作为空白液，用来校正分光光度计零点及调整透光度至100。

3. DNA纯度及浓度的测定：

①取3微升的DNA样品加入比色杯，加dH2O至3000微升，混匀。

②将比色杯置入分光光度计中，调入射光波长，分别用空白溶液调整零点（T为100，OD为0），测待测样品在260nm、280nm、230nm的OD值。

③计算浓度：

DNA浓度（ug/ml）=A260×50ug/ml×稀释倍数

对于双链DNA 1.0 OD260=50 ug/ml

对于单链RNA 1.0 OD260=40 ug/ml

4. 纯的DNA溶液其OD260/OD280应为1.8，OD260/OD230应大于2.0。

⑴ OD260/OD280大于1.9时，说明有RNA污染，小于1.6时表明有蛋白质或酚污染。

不是用来测浓度的，可以用来做基因的拷贝数。测浓度最经典的还是紫外分光光度计，当然会有偏，不过总体来说还是可以的。也可以用酶标仪。

实时荧光定量pcr就是qpcr吗

实时荧光定量PCR（qPCR）用什么试剂盒比较好 加入荧游标记探针，巧妙地把核算扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起，借助于荧光讯号来检测PCR产物。一方面提高了灵敏度，另一方面还可以做到PCR每回圈一次就收集一个数据

实时荧光定量pcr与荧光定量pcr一样么?这里的实时是什么意思

是一样的，所谓的实时就是在仪器上可以随时观察pcr产物的扩增的情况。一般也叫实时定量PCR

实时荧光定量PCR注意事项

1. 按照正确的开关机顺序作，有助于延长仪器的使用寿命，减少仪器出故障的频率。开机顺序：先开电脑，待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机，等主机面板上的绿灯亮后即可开启定量PCR的收集软体，进行实验。关机顺序：确认实验已经结束后，首先关闭讯号收集软体，然后关掉定量PCR仪主机的电源，关闭电脑。

2. 应该定期备份您的实验资料，备份频率每周一次，用光碟烧录。同时您也应该备份定量PCR仪的各种纯荧光光谱校正档案、背景档案和安装验证实验资料，这些档案所在的目录是C：/Appliedbios/SDS Document。

3. 良好的实验室环境有助于延长仪器的使用寿命，减少仪器出故障的频率。做到以下几个方面：

电源：配备合适的UPS或稳压器。

通风：仪器的通风应该没有阻挡。

温度：实验室配备空调，温度应该控制在10-30°C之间。

溼度：20-80%；对于潮溼的省份，实验室配备除溼机。

空间：易于作，安全。

4. 怎样判断定量PCR仪的样本加热块是否被污染？怎样清除污染

一个办法是执行背景校正反应板，当一个或多个反应孔连续显示出不正常的高讯号，则表明该孔可能被荧光污染物。另外一种办法是在不放任何物品到样本块上的前提下，执行ROI的校正，当某个孔的讯号明显高出其他孔时，则表明该孔被污染。

清除样本加热块污染的步骤如下：用移液器吸取少量乙醇并滴入每个污染的反应孔中。 吹打数次。 将废液吸入废液杯中。重复以上步骤：乙醇三次，去离子水三次。确认反应孔中的残留液体蒸发完。

biorad实时荧光定量pcr多少钱

采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂，用本制品进行Real Time qRT-PCR 可在同一反应管内连续进行。反应过程中无需开启管盖新增试剂并可对扩增产物进行实时检测，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。非常适合于微量RNA 尤其是微量RNA的检测。本试剂盒包括最适合Real Time PCR的突变改造M-MuLV H Minus逆转录酶(TRUEscript RTase)、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasinmix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性。同时该酶提高了耐热性，可以在42-50℃反转录，提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率。而采用优质热启动酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生，大大提高了荧光定量PCR反应的性。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。

适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；部分高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。杭州昊鑫生物的，大概50次的900块钱左右.

Thermo Scientific的PikoReal实时荧光定量PCR仪好用吗

还可以。Termo，Biored，罗氏的定量PCR仪都挺好用的，也属于高阶品牌。

实时荧光定量pcr结果2.83e+08

对於乙肝的DNA化验来说，不能不算是高科技。但是所出的结果却不能用来描述病情的程度。

这里有两个概念必需先说明。是乙肝患者，乙肝是乙型肝炎的简称，是肝炎。而肝要是发炎了，病人一定是会有不舒服的表现的。第二是乙肝携带者，乙肝携带者的肝并没有发炎，也就是说与正常人一样，没有什么不舒服的表现。于是乙肝患者与乙肝携带者的主要区别就是看肝是否发炎。请简单的想一下，肝没有发炎不就是没有病呀。所以只有乙肝患者需要治疗，而乙肝携带者由于不处于疾病状态之下，再说了，对於乙肝携带者来说，有许多人可能化验DNA数值要比你的结果高许多。可是由于肝并没有发炎，所以不需要进行任何的治疗。

实时荧光定量pcr结某1.83e十02

一般是代表每毫升样品中有183个目的拷贝。但是这个数字是不准确的，已经在检测限以下了

定量PCR仪的开关机顺序是怎样的？

开机顺序：先开电脑，待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机，等主机面板 上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件，进行实验。

关机顺序：确认实验已经结束后，首先关闭信号收集软件，然后关掉定量PCR仪主机的电源，关闭电脑。

实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。

原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的异。正常化后可以设定域值水平，这就是分析荧光数据的水平。

扩展资料

主要作流程：

1、针对目的基因序列选择合适的扩增片断，设计引物。DNA引物长度：15-25 个碱基GC含量：50%左右如果引物的与AT区域富集结合，可以考虑用LNA替换几个碱基，较少引物的长度以及避免引物次级结构和3’端二聚体的影响.由于引物和模板和探针与靶点之间的分之间的相互竞争，分之内杂交。

倒转重复等等会引起引物的引发探针对结合效率达降低，因此我们选择引物二聚体的△G为负值，即：<10 kcal/mol.没有连续的G/C。引物探针的保存一般遵循以下原则：正向和反向引物保存在-20度，浓度为10mM 或者10×工作浓度.探针应该避光保存，贮存在-70度，以状态，工作浓度的液体保存一般两周左右。

2、输入靶序列，用进行比对；

3、检查比对序列的多态性以及可能的错误避免这些区域来进行引物和探针设计；

4、在靶序列中避免直接待重复区，在重复区进行杂交容易使得引物非获得产物性结合，降低DNA的扩增效率以及减少分析的灵敏度；

5、考虑到潜在的剪接变异体以及合适的所需要的获得到靶，通过学分析内含子以及外显子的边界，主要通过cDNA和基因组序列比对来确定。一般都设计跨最长内含子区，这样减少了扩增子受到基因组DNA的污染的影响。这是十分有必要的，特别当用DNA做归一化处理以及靶向某一特异的剪接变异体。

最经济的做法是让下游引物跨越剪接接头，这样允许使用一条探针检测可能剪接变异体.然后如果在有效性和灵敏度无法保证情况下，可以使用跨越单一外显子的设计方案。我们还是建议试验者用DnaseI处理样品，除去gDNA的污染；

6、在RT步骤时，用工具检测在特定温度下靶序列的折叠情况，避免一些高度次级结构的区域，那些区域探针和引物结合效率较低。

参考资料来源：

参考资料来源：

实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么？结果有何异同？能说明的问题是什么？

二者结果相同。都能说明生物体外的特殊DNA的整个过程的扩增效率和溶解温度情况。

区别：

1、二者系统组成不同

荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统。

2、二者原理不同

荧光定量PCR实时监测与DNA结合的荧光染料激发的荧光，普通OCR通过检测插入DNA中核算染料的量来测定PCR最终产物量。

3、二者反应要求不同

荧光定量PCR对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp，普通PCR可以扩增长点的片段。

4、二者应用不同

荧光定量PCR主要是用来定量分析和确定基因转录水平的，普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段，定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作，反之不行。

5、二者测量成本不同

定量PCR仪价格较为昂贵，普通的基因扩增仪(PCR仪)只能够定性地分析是否存在目标片段。但是价格要低很多，而且运行成本也要低很多。

实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。

参考资料来源：

参考资料来源：

pcr检测是什么意思方法及步骤

检测是目前全球用来对是否携带进行确定的一种有效方式。目前大家主要使用的是鼻拭子、咽拭子以及抗体血清lgm进行参考。但是根据最新的新加坡入境要求是进行pcr检测，那么pcr检测是什么意思呢？

pcr检测是什么意思

PCR的意思是聚合酶链式反应，能够用来扩增DNA，从而将微量的DNA扩增到能够检测的程度。有些的是DNA，需要采用这个方法进行检测。所以PCR并不是进行的检查，而是检测DNA的一种方法。比如乙肝DNA定量，用的就是这一种方法。检查DNA的目的，一方面是可以诊断疾病，如果连病原体的DNA都能检测到，就说明感染了这种病原体;另一方面是判断的多少，从而判断病情程度或者治疗效果。

pcr检测方法与步骤

进行检验，需要经过取样、留样、留存、提取、上机检测五个步骤。

检测的步就是采集人体分泌物，用鼻试子或咽试子擦拭鼻腔或咽后壁及双侧咽扁桃体处。

第二步医务人员进行留样，将试子头浸入细胞保存液中，折断尾部后立即旋紧管盖。

第三部要将样本放入密闭袋中，保存好并及时送检。

第四步将样本送进实验室，提取。

第五步，将提取物进行荧光PCR扩增反应。

是什么

(nucleicacid)，是一类由核苷酸(nucleotide)构成的生物大分子，分为核糖(ribonucleic

acid，RNA)和脱氧核糖(deoxyribonucleic

acid，DNA)两类，其中RNA多为单链结构，DNA多为双链结构。除朊(prion)外，是构成生命所必需的生物大分子，其主要作用是构成生命体的遗传信息载体，除此之外，还有部分可作为及参与构成具有生物活性的酶分子或其他分子机器

。检测是什么

检测顾名思义就是针对开展检测。

检测有何独特的优势呢?为何能作为确诊的“金标准”呢?

其实每一种检测方法都有其擅长的应用场景。以检测为例，通常的免疫学检测方法(胶体金、ELISA、化学发光等)的检测对象是的抗原或抗体，相当于“侧面描绘”。由于从感染到可检测存在一个时间窗口期，因此免疫学检测方法一般不合适作为早期诊断。

阳性与阴性

1、阳性

阳性通常比较少。一般实验室人员作不当会导致样本间交叉污染或扩增产物的遗留污染，该种情况下可能会导致阳性。

不过阳性可以通过严格控制检测流程、以及执行若干个阴性样本随机参与检测的策略而有效规避。

2、阴性

在这里需要说明的是，PCR检测的阴性与临床的阴性实际上不是一个概念。

以网络上激烈讨论的的诊断为例，临床阴性是指临床症状和影像学高度疑似被感染、但PCR检测却多次或始终为阴性的情况;而PCR检测阴性是指所采集样本中存在足够量的新型但却没有检出的情况。

避免检测的阴性，主要需要解决：(1)被感染者的细胞中有足量的、(2)采集样本中可以采集到含有的细胞、以及(3)检测出样本中的这三个环节。

其中PCR试剂盒的技术参数优劣主要影响第三个检测环节。

仅针对第三个检测环节，若样本中数量低于一个程度(低于检测限)，PCR试剂盒就无法检出。从这个角度看，PCR检测的阴性是无法完全避免的。这也是为何需要补充开发的特异抗体检测的原因所在。

沈阳PCR检测实验室

实验室建设坚持高标准、严要求，严格按照《医学生物安全二级实验室建筑技术标准》进行建设，建设面积100余平方米，分为试剂贮存和准备区、标本制备与提取区、扩增和产物分析区三个区域。实验室内配置全自动提取仪、实时荧光定量PCR仪、扩增仪、高压灭菌器、B2型生物安全柜、超净工作台、超低温冰箱等仪器，消毒和防护设施齐全，符合相关生物实验室安全标准。为防止实验室外的区域被污染，实验室的气压均为负压，有效降低感染风险。此外，实验室配备了污水处理系统，达到了废液的合理排放和处理。

目前我国多地区建设了PCR检测实验室用以进行检测